Участници: Елена Стоянова

Наименование на посетената институция: Група по физиология на човека и животните, Департамент по животински науки, Вагенински университет, Вагенинген, Холандия

Период на посещение: 1 май – 30май 2012г.

Цел на посещението: Парктическо обучение за приготвяне на хистологични препарати и микроарей анализ.

Програмата включваше:
• Запознаване с научната група, лабораторните техники и разработваните теми в лабораторията. Основните проблеми, които се разработват в лабораторията са метаболизъм на хранителните вещества, метаболитно здраве и пластичност, ефект на биоактивни хранителни компоненти и физиологични фактори върху функцията на различни физиологични системи при мишки.
• Посещение на следните лекции:

- High-content cell analysis – BDPathwayBrochure.

High Content Analysis (HCA) е автоматизиран флуоресцентен микроскоп, чрез който изображенията се превръщат в компютърни алгоритми, които могат да дадат количествена оценка на оцветяването в различни области на изображението.

- Сънят, загуба на време?

Представени бяха данни за продължителността на съня при различните животни и човка. Обсъдени бяха теми като:
Нормална продължителност на съня при човека;
Заболявания, засягащи продължителността на съня;
Подходи за изследване и лечение на нарушения на съня.
• Обучение за приготвяне на хистологични препарати от миши тестиси, мастна и мускулна тъкан. Методите включваха фиксиране на тъкани и органи, подготовка на материалите за включване (дехидратация, миене и инфилтрация), включване в парафин, рязане на парафиновите блокчета на тънки срези и оцветяване. Бяха демонстрирани имунихистологично оцветяване за наличие и разпределение на бърз миозин и полизахариди в мускулна тъкан.

Фиг. 1. Имунохистохимично оцветяване за бърз миозин комбинирано с Хематоксилин/Еозин оцветяване в миши мускулни фибри. Бързият миозин е оцветен в кафяво, ядрата на клетките в синьо, а еластинът, колагенът и ретикуларните фибри в розово.

Фиг. 2. Оцветяване на полизахариди (Periodic-acid-schiff - Heamatoxiline staining) в миши мускулни фибри. Ползахаридите са оцветени в тъмно-виолетово; фибринът, плазмата и колагенът в светло-виолетово, а ядрата на клетките в синьо. Оцветяването на полизахаридите (А) би трябвало да съотведства на оцветяването за бърз миозин (В). Жълтите звезди маркират фибрите, които са оцветени за бърз миозин (С).

• Обучение по микроарей техники за анализ, което включва изолиране на тотална РНК, обратна транскрипция с флуоресцентно белязане, хибридизация, сканиране и анализ на резултатите.
• Участие в лабораторните семинари на Групата по Физиология на Човека и Животните, представяне на резултати, получени по време на обучението и на резултати от работата за получаване на индуцирани плурипотенти стволови клетки в ИБИР.
• Посещение на вивариум за малки и големи животни към Университетът във Вагенинген и запознаване с възможностите за провеждане на експерименти с малки животни.